猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）使用说明书

产品信息

产品名称：猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：Test Kit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus (ELISA)

包装规格：96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

预期用途

猪瘟是一种由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus, CSFV）引起的高度传染性疾病，具有出血性和致死性。其主要特征包括高热、微血管壁变性所导致的广泛出血及坏死等。本试剂盒用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体，能够有效评估猪瘟病毒疫苗的免疫效果。

原理

本试剂盒包含预包被有猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他相关试剂，采用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中的猪瘟病毒抗体。在实验过程中，通过将对照血清和待测样品加入酶标板，若样品中含有猪瘟病毒抗体，将与板上抗原结合。洗涤后添加酶标记物，并通过反应生成可测量的信号，最终通过酶标仪测定样品中的抗体存在情况。

储存条件及有效期

本试剂盒应在2~8℃储存，有效期为12个月。开封后的包被板应避光储存于2~8℃，使用期限为2个月。

适用仪器

本试剂需配备包含450nm、630nm波长的酶标仪、37℃恒温设备以及可调微量移液器。

样品准备

1. 动物全血需按常规方法制备清亮无溶血的血清，样品可在2~8℃保存1周，长期需置于-20℃。

2. 将待检血清稀释40倍（例如5μl血清加入195μl稀释液中），阴阳性对照不需稀释。

3. 使用前将浓缩洗涤液溶解，稀释成工作洗涤液。

检验方法

1. 试剂盒使用前置于室温30分钟。
2. 将酶标板条上适量阴性阳性对照孔设置。未使用的板条密封后保持在2~8℃储存。
3. 各取100μl阴阳性对照及稀释样品至相应孔中。
4. 反应后加入工作洗涤液并进行洗涤。
5. 添加酶标记物，避光反应30分钟。
6. 重复洗涤，添加底物液并反应10分钟后加入终止液。
7. 最后测定各孔的吸光值。

结果判定

在正常实验情况下，阴性对照的OD值应≤0.3，阳性对照应≥0.6。通过计算SP值可判定结果：SP值≥0.2判断为阳性，SP值<0.2判断为阴性。

实验注意事项

1. 操作过程中务必佩戴手套及工作衣，严格执行消毒隔离制度。
2. 终止液具有腐蚀性，应避免与皮肤直接接触。
3. 尽量避免将未用完的酶标板暴露在潮湿环境中。
4. 所用洗涤液需确保完全溶解。
5. 样品应保持新鲜，试验结果以酶标仪读取为准。

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